▋ DNA 化学合成基本知识
人们现今对 DNA 的分析，举例来说是通过多重 PCR、real-time PCR 和对稀有事件的研究者来展开的，因此极好化学合成 DNA 非常重要。极好的分析产物是赢取极好的下游检验结果的必要条件。我们只能了解 DNA 化学合成子系统的文书工作定律，然后针对后续应用于选择最适合的化学过程。
DNA 化学合成类似的面对
● 降解仪器从而拘禁 DNA● 将 DNA 底物与脂质、核酸、糖类和 RNA 等其他底物复合● 保持 DNA 底物的一致性
DNA 可能多种不同导致的面对也多种不同。例如冰淇淋等的食品，其中的含有抑制性的有机化合物，如果这些有机化合物被已化学合成的 DNA 携上头，则或许抑制下游的检验。从革兰氏阳性病原体中的复合 DNA 无并不需要高效的降解病原体厚厚的肽聚糖细胞内壁。一定要确保你用作的 DNA 化学合成工具能够妥善解决样本导致的问题。
温馨高亮：肠道和秘密组织样本在用作前无需冷冻保存，以避免不止现小分子对 DNA 的损坏。在取不止一小部分展开 DNA 化学合成之前无需将加温后的肠道仅仅混合。
DNA 化学合成基本步骤
DNA 化学合成：降解、融合和干净
降解：损坏细胞内或秘密组织-酶附近理-机械损坏-去垢剂附近理
降解：使核酸变性或失掉活性-氢离子去垢剂、加热、催化剂、尿素和胍类-多糖（如多糖 K）
降解：使内源性小分子-螯合剂（例如 EDTA）-多糖（例如 多糖 K）
融合与干净：复合 DNA-移除其他核酸（如 RNA）-移除核酸 •有机萃取 •灶析 •与固常为表征融合 -硫化物基质 -化合物对等柱 -固态粒状
融合与干净：从其他细胞内生物体中的复合 DNA 的工具
■ 有机萃取
当苯酚或苯酚: 混合物与细胞内降解物混合时，会形成两常为：水常为和有机常为。水分子 DNA 底物踏入水分子常为或「水常为」，而变性的核酸和其他细胞内碎裂则踏入有机常为。
■ 灶析
灶可以让核酸脱水，从而降低其水分子，然后变性，变性后的核酸夺去溶解性从而水合；通过离心法移除水合的核酸和细胞内碎裂。常见的灶以外以外碳酸盐、草酸铋或草酸铵。
■ 与固常为表征融合
绝大多数的 DNA 化学合成工具主要依据的定律是：通过游离地与固常为表征融合, 从而从粗降解物中的化学合成 DNA。这类固常为表征以外硫化物表征和化合物对等树脂。举例来说来说，用作固常为表征化学合成 DNA 比其他工具五小更粗、系统设计更有效率，因为不无并不需要任何氧化剂，而且可以微型化和自动化从而实现高通量。
与 DNA 融合的固常为表征类型
硫化物基质：DNA 会在高酸度离液灶（例如灶酸胍）存在的但会与硫化物融合，但是核酸不会。可以用作含有乙醇的干净液施用灶，然后在低氢离子强度的硫酸（例如 TE 或水）中的下手 DNA。
化合物对等柱：化学合成的主要定律是 DNA 中的上头电荷的磷酸羧基与对等柱上上头正电荷的底物之间电磁力。在低灶条件下，DNA 与表征融合，而核酸和 RNA（取决于所用的糖类）则被干净施用。DNA 可以用高灶糖类下手。
在粒状表面展开的 DNA 固态复合：许多普及化试剂盒的文书工作定律是用作固态粒状从硫酸中的捕捉到 DNA。固态粒状可以由硫化物等材料制成，DNA 的融合和下手取决于灶酸度或 pH。
DNA 、酸度和一致性
纯的、完整的 DNA 对于许多下游精确测量至关重要。常见指标 DNA 的常见工具是在 260nm 的频率附近（DNA 在该频率下有小得多吸收岭）精确测量样本吸伴星。通过精确测量 280nm 频率附近的吸伴星，并且计算 260nm 与 280nm 附近的吸伴星之比，可以检验不止化学合成过程中的或许用作到的或残留在样本中的的其他有机有机化合物。萤光染色和 qPCR 是计算 DNA 酸度并明确制品一致性的替代工具，主要在本指南后续关于核酸分析工具节选展开详细讨论。
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撰稿： 翟超男相关新闻
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